Wie wählt man eine Probenkonservierungslösung aus?

Wie wählt man die Art der Konservierungslösung?

Je nach Zusammensetzung der Flüssigkeit kann man sie grob in zwei Typen einteilen: inaktivierte und nicht inaktivierte. Unter anderem enthält die inaktivierte Viruskonservierungslösung Tris, Guanidinsalz, EDTA usw., deren Hauptzweck darin besteht, die Proteinhüllen von Zellen und Viren zu zerstören und Nukleinsäuren freizusetzen, sodass der Nukleinsäurenachweis durch anschließende Echtzeit-Fluoreszenz-RT-PCR durchgeführt werden kann, um festzustellen, ob die Probe die Virussequenz enthält.

Die inaktivierte Konservierungslösung kann die Struktur des Virus effektiv lysieren und dazu führen, dass es seine Infektionsfähigkeit verliert. Es ist für die Prüfer sicherer und kann die Vermehrung von Pilzen und Bakterien wirksam hemmen. Aufgrund der Zugabe von Guanidinsalz können jedoch Salzionen in der Nukleinsäurelösung verbleiben. Wenn die Konzentration zu hoch ist und die Polymeraseaktivität im nachgeschalteten Testkit sehr empfindlich auf die Salzionenkonzentration reagiert, führt dies dazu, dass der Ct-Wert des Tests verzögert oder sogar falsch negativ ist.

Die nicht inaktivierte Konservierungslösung umfasst im Allgemeinen UTM- und VTM-Typen. Die Komponenten der nicht inaktivierten Viruskonservierungslösung basieren hauptsächlich auf Hanks Lösung. Auf der Grundlage von Hanks Lösung werden außerdem verschiedene Puffer wie Gentamicin, Pilzantibiotika, BSA (bovine fünfte Komponente von Serumalbumin), biologischer Puffer HEPES, Aminosäuren, Kryoschutzmittel, Glycerin und andere Komponenten hinzugefügt, um die Integrität und biologische Aktivität des Virus aufrechtzuerhalten. Die nicht inaktivierte Konservierungslösung bewahrt die Integrität des Virus besser, sodass die Erkennungsrate höher ist, vor dem Nachweis ist jedoch eine Wasserbad-Inaktivierungsbehandlung erforderlich.

Benutzer können die Art der Konservierungslösung entsprechend ihren eigenen Nutzungsszenarien sinnvoll auswählen.

2、Wie hoch ist die Nachweisempfindlichkeit nach der Probenlagerung?

Um die Auswahl verschiedener Arten von Lagerröhrchen zu erleichtern, haben wir verschiedene Marken unter 4℃ Lagerbedingungen und an verschiedenen Lagertagen getestet. Die Empfindlichkeit des Nukleinsäurenachweises des neuen Coronavirus ist wie folgt.

Nach 14-tägiger Lagerung bei 4°C erfolgt der Vergleich der Konservierungswirkung verschiedener UTM-Marken

Um die Auswahl verschiedener Arten von Konservierungsröhrchen zu erleichtern, haben wir die Empfindlichkeit des Nukleinsäurenachweises des neuen Coronavirus unter verschiedenen Marken, Lagerungsbedingungen bei Raumtemperatur und verschiedenen Lagerungstagen (erster Tag, dritter Tag und siebter Tag) getestet. Die Ergebnisse sind wie folgt.

Nach 7 Tagen Lagerung bei Raumtemperatur Vergleich der Lagereffekte verschiedener ITM-Marken

Nach 7 Tagen Lagerung bei Raumtemperatur Vergleich der Lagereffekte verschiedener VTM-Marken

Nach 7 Tagen Lagerung bei Raumtemperatur Vergleich der Lagereffekte verschiedener UTM-Marken

Im Allgemeinen ist der Ct-Wert von Bioteke niedriger als der einiger gängiger Marken auf dem Markt, unabhängig von Raumtemperatur oder 4℃ Lagerbedingungen. Die Nachweisempfindlichkeit ist höher und die Testergebnisse sind stabiler.

3、 Welche Wirkung hat die Inaktivierungskonservierungslösung (ITM)?

Anzahl der Plaques zu verschiedenen Zeitpunkten der Inaktivierung (0, 1, 2, 5, 10, 20, 40 Minuten)

Plaque-Zahlen zu verschiedenen Inaktivierungszeiten (0, 1, 5, 40 Minuten) (Plaque ist im roten Kasten dargestellt)

Schlussfolgerungen:

Das Produkt Bioteke, das Transportmedien (ITM) inaktiviert, kann das HSV-1-Virus wirksam inaktivieren.

4、Funktionen der Bioteke Virus Preservation Solution

a) Bereitstellung mehrerer Arten von Aufbewahrungslösungen wie UTM, VTM und ITM;

b) Es kann mit dem Bioteke-Tupfer verwendet werden, um mehrere Anforderungen zu erfüllen;

c) Ausgewählte Rohstoffe, abgestimmt auf das Bioteke-Nukleinsäure-Extraktionskit, um die anfängliche Kopienmenge der Probe sicherzustellen.

5. Die Inspektionsberichte, die Bioteke für die Virus Preservation Solution erhalten hat

Anhang: Produktionsumgebung

Referenzen

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【2】《Vorläufige Richtlinien für die Sammlung, Handhabung und Prüfung klinischer Proben von untersuchten Patienten (PUIs) für das neuartige Coronavirus 2019 (2019-nCoV)》.

【 3 】 A Stephen K Hashmi, Miriam Bührle, Michael Wölfle,et al.

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