Human Papillomavirus (HPV) Genotypisierungs -Detektionskit (Fluoreszenz -PCR -Methode)

A. beabsichtigte Verwendung

• Dieses Kit wird zum qualitativen In-vitro-Nachweis von Human Papillomavirus (HPV) mit hohem Risiko und geringem Risiko verwendet.

• Das Hochrisiko-HPV umfasst Typ 16,18,26,31,33,35,39,45,51,52,53,56,58,59,66,68,73,82;  

• Das HPV mit niedrigem Risiko umfasst Typ 6,11,40,42,43,44/55,54,57/71,61,70,72,81,84.

B. Prinzip

• Dieses Reagenz ist ein Multiplex-Fluoreszenz-Sonden-basierter Taqman® QPCR-Assay-System.

• Spezifische Primer und Sonden sind zum Nachweis verschiedener Arten von menschlichem Papillomavirus (HPV) ausgelegt.

• Interne Steuerung (IC) wird als Überwachungsmethode verwendet, um falsch negative Testergebnisse zu vermeiden.

• Das UDG -Enzym/DUTP -System wird hinzugefügt, um das Amplifikationsprodukt zu beeinträchtigen, um falsch positive Ergebnisse zu vermeiden.

• Dieses Kit ist ein vollständig vorgemischtes lyophilisiertes System. TAQ-Enzym, UDG-Enzym, Reaktionspuffer, spezifische Primer und Sonden wurden in den Reagenzien vorbestellt.

C. Komponenten

Konponenten	8 Proben/Kit	24 Proben/Kit	Bestandteil
HP04 Lyophilisierter Reagenz	8 × 8 Streifenrohre	24 × 8 Streifenrohre	Spezifische Primer & Sonden für den Nachweis von Zielpathogenen, DNTP/DUTP -Mix, Mg2+, TAC -Polymerase und UDG -Enzym
HPV Lysepuffer	1 ml × 1 Rohr	2,5 ml × 1 Rohr	Oberflächenwirksames Mittel, ausgeglichener Salzlösung
HPV -Positivkontrolle	400 ml × 1 Rohr	400 ml × 1 Rohr	Plasmid, das jede Zielgensequenz enthält
HPV -Negativkontrolle	400 ml × 1 Rohr	400 ml × 1 Rohr	Plasmid, das interne Kontrollsequenz enthält
Lösung auflösen	1 ml × 1 Rohr	1 ml × 3 Röhrchen	Stabilisator

D. Lagerung und Haltbarkeitsdauer

Transport bei Raumtemperatur unter 37 ° C (＜ 1 Monat).

Speichern Sie 1 Jahr bei -20 ℃ ± 5 ℃.

Wiederholtes Einfrieren und Auftauen sollte das 7 -fache nicht überschreiten.

E.  Überblick über den Testprozess

F. PCR -Amplifikation

1. Stellen Sie die Reaktionsrohre in ein PCR -Instrument ein und stellen Sie die Namen jeder Reaktion gut in die entsprechende Reihenfolge.

2. Wählen Sie FAM, VIC/HEX, ROX und CY5 Vier Fluoreszenzkanäle zur Nachweis. Die entsprechenden Ziele jedes Fluoreszenzkanals sind in der folgenden Tabelle angezeigt:

Standort	Fam	Vic/Hex	Rox	Cy5
Nun 1	HPV Typ 16	HPV Typ 18	HPV Typ 26	Interne Steuerung (IC)
Gut 2	HPV Typ 31	HPV Typ 33	HPV Typ 35	HPV Typ 39
Nun 3	HPV Typ 45	HPV Typ 51	HPV Typ 52	HPV Typ 53
Nun 4	HPV Typ 56	HPV Typ 58	HPV Typ 59	HPV Typ 68
Nun 5	HPV Typ 66	HPV Typ 73	HPV Typ 82	HPV Typ 81
Nun 6	HPV Typ 6	HPV Typ 11	HPV Typ 40	HPV Typ 42
Nun 7	HPV Typ 43	HPV Typ 44/55	HPV Typ 54	HPV Typ 61
Nun 8	HPV Typ 57/71	HPV Typ 70	HPV Typ 72	HPV Typ 84

G.  Ergebnisanalyse und Interpretation

Bitte beachten Sie das Benutzerhandbuch.

H. Leistungsspezifikation

1. Einschränkung der Entscheidung: 1000 Kopien/ml

2.Prezision: Der Variationskoeffizient (CV,%) des CT-Werts von innerhalb des Batch/zwischen den Batch-Genauigkeit beträgt ≤ 5%.

3. Akzenta: Die Konformitätsrate der negativen/positiven Referenz: 100%.

4.Spezifizität: Die Farget-Organismen wurden in Silico auf mögliche Kreuzreaktivität mit den Primern oder Sondensequenzen analysiert.

Die Homologie mit anderen Arten liegt unter 80%.

Die Spezifitätsanalyse zeigte, dass es keine Kreuzreaktion mit Trichomonas vaginalis, Neisseria gonorrhoeae, Chlamydia trachomatis, Gardnerella vaginalis, Haemophilus Ducreyi, Candida albicans, Streptokokken -Agalactiae, Mycoplasma, Mycoplasma, mykoplasma, mykoplasma, mykoplasma, mykoplasma, mykoplasma, mykoplasma, mykoplasma, mykoplasma, mykoplasma, mykoplasma, mykoplasma, mykoplasma, ursprünglich, mykoplasma, harmonisch Pallidum, Herpes -Simplex -Virus -Typ 1 & 2.