veröffentlichen Zeit: 2022-05-25 Herkunft: Powered
Die Herstellung einer kolloidalen Goldlösung für die Antigen -Test übernimmt die Trisodium -Citratreduktionsmethode, um eine kolloidale Goldlösung herzustellen. Nehmen Sie 1000 ml Ultrapurwasser und erhitzen Sie es auf einen magnetischen Rührer, addieren Sie 40 ml 1% Chloraurinsäure -Lösung. Wenn die Lösung erneut kocht, addieren Sie schnell 36 ml 1% Trisodiumcitrat -Lösung, kochen weiter, wenn die Farbe von färbt Die Lösung macht lila 5 min, schaltet die Heizung aus und restauriert nach dem Abkühlen das Originalvolumen mit ultralem Wasser. Der durchschnittliche Durchmesser- und Zeta -Potential von kolloidalen Goldpartikeln wurde mit einem Analysator der Nanopartikelgröße gemessen und bei Raumtemperatur im Dunkeln gespeichert. Was sind die Informationen über die Herstellung kolloidaler Goldlösungen für den Antigen -Test? Schauen wir uns an.
Hier ist die Inhaltsliste:
l Vorbereitung von kolloidalen Gold -markierten Konjugaten
l Vorbereitung von schnellen Antigen -Teststreifen
l Mindesterkennungsgrenze
l Stabilitätstest
Nehmen Sie 100 ml Antigen -Test -kolloidales Gold in zwei saubere Becherer nach den optimierten markierten pH -Bedingungen, 3,3 ml und 2,1 ml 0,1 mol/l Kaliumcarbonat, um den pH -Wert einzustellen, mit einem magnetischen Rührer bei 300 r/umrühren min für 10 min und fügen Sie Maus-Anti-N-Protein-monoklonaler Antikörper und DNP-BSA-Protein hinzu und wurden 15 Minuten lang gerührt; 2 ml 10% BSA -Lösung wurde zugegeben und 2 ml 10% BSA -Lösung wurden zugegeben, und das Rühren wurde 20 Minuten lang fortgesetzt; Nach dem Rühren wurde die kolloidale Goldlösung des Antigen -Tests in zwei 50 -ml -Zentrifugenröhrchen übertragen, die Zentrifugenparameter waren 9000 R/min, 20 min und 4 ° C und es wurde eine Zentrifugation durchgeführt. Nehmen Sie nach der Zentrifugation das Zentrifugenröhrchen sorgfältig heraus, schütteln Sie nicht, entfernen Sie den Überstand mit einer Pipette, sammeln Sie den Niederschlag mit konjugierten Verdünnungsmittel auf 10 ml und speichern Sie ihn bei 4 ° C im Dunkeln. Der durchschnittliche Durchmesser- und Zeta -Potential der kolloidalen Goldkonjugatpartikel des Antigen -Tests wurde durch einen Nanopartikelgröße analysator gemessen.
Das Probenkissen wurde gleichmäßig mit der Probenpad -Behandlungslösung beschichtet und die Beschichtungsmenge jeder Glasfaser betrug 30 ml und 24 Stunden bei 50 ° C getrocknet. Verdünnen Schnellantigen -Test kolloidales monoklonaler Antikörper und kolloidales DNP-BSA-Protein-konjugat mit konjugidverdünnung, das Volumenverhältnis beträgt 18% bzw. 20% Mit Flüssigkeit beschichtet, betrug die Beschichtungsmenge jeder Glasfaser 30 ml und wurde 24 Stunden bei 45 ° C getrocknet. Der monoklonale Maus-Anti-N-Protein-Antikörper und der polyklonale Anti-DNP-Anti-DNP-Antikörper wurden mit PBS verdünnt, das 0,01 mol/l Ph7,4 bzw. 5% Trehalose auf die Konzentration von 2,0 mg/ml bzw. 1,0 mg/ml enthielt. Als Detektionslinie (T -Linie) und die Qualitätskontrolllinie (Cline) wurde der Einfangantikörper auf eine Nitrocellulosemembran (NC -Membran) beschichtet und 48 Stunden bei 45 ° C getrocknet. Der vorbereitete NC-Film, das Konjugatpad, das Probenblock und das Wasserabsorbing-Pad wurden nach dem PVC-Bodenplatte nacheinander geklebt, mit einem Slitter in 3 mm/Streifen geschnitten, in eine Kartenhülle gelegt und in einem Aluminiumfolienbeutel verpackt. Fügen Sie während des Tests den nasopharyngealen Tupfer in das mit der Extraktionslösung (10 mmol/lpbs, pH7.4, 1%NP-40) vorgefüllte Hubrohr ein und fügen Sie 3 Tropfen (100 & mgr; l) zum Probenloch des Tests ab. Karte nach Extraktion für 15s. 15 Minuten Reaktionszeit für die visuelle Interpretation. Antigen-Test-T-Linie und Cline sind beide positiv, die T-Linie ist nicht gefärbt, Cline ist negativ, Cline ist nicht gefärbt, was darauf hinweist, dass der Teststreifen wirksam ist und erneut getestet werden muss.
Die Studien zur Erkennung von Erkennungsgrenzen wurden mit Hitze-Viruskulturen durchgeführt. Der Eluat aus Nasopharyngealströmen von gesunden Menschen wurde als negative Matrix für den Antigen -Test verwendet. Zunächst wurde eine 10-fache Gradientenverdünnung durchgeführt. Nach dem negativen Ergebnis des schnellen Antigentests war die vorherige Konzentration dann die 2-fache Gradientenverdünnung und nicht weniger als 19 Mal von 20 Tests waren positiv. Das Konzentrationsniveau (≥ 95%) wurde als Mindestdetektionsgrenze des Reagenzs verwendet.
Legen Sie den vorbereiteten Antigen -Test -Reagent -Karte in einen 50 ° C -Ofen und testen Sie alle zwei Wochen mit hohen und niedrigen Konzentrations -Kontrollsubstanzen. Wiederholen Sie den Test dreimal für jede Probe. Der Unterschied in der Bandtiefe zwischen dem hohen Temperaturbeschleunigungsreagenz und dem Kontrollreagenz für 1 Woche und 8 Wochen.
Die oben genannten sind die relevanten Informationen über die Herstellung der kolloidalen Goldlösung für den Antigen -Test. Wenn Sie an der interessiert sind Covid-19-Schnellantigen-Test, SARS-COV-2-Schnellantigen-Test, Sie können uns kontaktieren. Unsere Website ist www.bioteke.cn.
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