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Was sind die spezifischen Schritte für die DNA -Extraktion und die RNA -Extraktion?

veröffentlichen Zeit: 2022-12-05     Herkunft: Powered

Extraktion von DNA, RNAund Proteine ​​sind eine grundlegende Methode, die in der molekularen Biologie verwendet wird. Diese Biomoleküle können aus jedem biologischen Material für die nachfolgende nachgeschaltete Verarbeitung, analytische oder präparative Zwecke isoliert werden. In der Vergangenheit war der Extraktions- und Reinigungsprozess von Nukleinsäure kompliziert, zeitaufwändig, mühsam und der Gesamtdurchsatz begrenzt. Derzeit stehen viele spezielle Methoden zur Extraktion reiner Biomoleküle zur Verfügung, wie z. B. lösungsbasierte und säulenbasierte Protokolle. Manuelle Methoden haben im Laufe der Zeit einen langen Weg zurückgelegt, und verschiedene kommerzielle Produkte umfassen vollständige Kits, die die meisten Komponenten enthalten, die zum Isolieren von Nukleinsäuren benötigt werden. Die meisten dieser erfordern jedoch wiederholte Zentrifugationsschritte, gefolgt von der Entfernung von Überstand und zusätzlicher mechanischer Verarbeitung. In den letzten Jahren gab es eine wachsende Nachfrage nach Automatisierungssystemen für mittlere und große Labors. Es ist eine Alternative zu arbeitsintensiven manuellen Methoden.



  • Was ist der Hauptunterschied zwischen DNA -Extraktion und RNA -Extraktion im DNA/RNA -Extraktor?

  • Was sind die spezifischen Schritte für die DNA -Extraktion und die RNA -Extraktion?

  • Was ist die Funktion DNA/RNA -Extraktor?



Was ist der Hauptunterschied zwischen der DNA -Extraktion und der RNA -Extraktion im DNA/RNA -Extraktor?


Der Hauptunterschied zwischen DNA- und RNA -Extraktion ist der pH -Wert. Für die DNA -Extraktion ist ein pH -Wert von 8 erforderlich, und für die RNA -Extraktion ist ein pH -Wert von 4,7 erforderlich. Die DNA neigt dazu zu dadieren und tritt in eine organische Phase bei saurem pH -Wert ein. Die alkalische Hydrolyse von RNA in einer alkalischen Umgebung tritt aufgrund des 2 'OH in Ribose auf. Es gibt auch einen weiteren wichtigen Unterschied. Der RNA -Extraktionsprozess reinigt RNA, während der DNA -Extraktionsprozess DNA reinigt. Der Extraktionsprozess von DNA erfolgt durch diese Stadien - Katabolismus von Membranproteinen und Lipiden, Zelllyse, Aggregation von Kataboliten in konzentrierter Salzlösung und Ausfällung von DNA in Gegenwart von Ethanol. Dieser 3-Stufen-Prozess kann zwei optionale Schritte enthalten



Was sind die spezifischen Schritte für die DNA -Extraktion und die RNA -Extraktion?


Der RNA -Reinigungsprozess besteht aus 4 verschiedenen Stadien - Zelllyse, Proteindenaturierung, RNA -Isolierung durch Zugabe von Chloroform und Phenol und Waschen des Pellets mit Ethanol. Die RNA -Extraktion ist die Reinigung von RNA aus biologischen Proben. Aufgrund des Vorhandenseins von Ribonuklease in Geweben und Zellen wird der Prozess kompliziert. Die Verwendung von Ribonuklease kann die RNA schnell abbauen. Die häufig verwendete Methode bei der RNA-Extraktion ist die Guanidin-Thiocyanat-Phenol-Chloroform-Extraktion. Basierend auf dem Prinzip der Zentrifugation und Phasentrennung

DNA -Extraktion, die die Trennung und Reinigung von DNA beinhaltet, ist ein chemischer und physikalischer Prozess. DNA -Proben können aus Paraffingewebeblöcken, Blut, Gewebeproben (gefroren) erhalten werden und tritt in den folgenden Schritten auf - Zelllyse, DNA -Isolierung und Niederschlag, sobald die Zellen lysed, konzentrierte Salzlösungen fördern, die Aggregation von Katabolmolekülen. Die Lösung wird dann zentrifugiert, um die DNA von Trümmerklumpen zu trennen, die differenzierte DNA mit Salzen kombiniert und im Zellzyklus verwendete Reagenzien verwendet werden, und zur weiteren Reinigung können Ethanolausfälle verwendet werden.



Was ist die Funktion DNA/RNA -Extraktor?


Die Funktion von a DNA/RNA -Extraktor soll die Nukleinsäuren -DNA und RNA von einer Probe isolieren und reinigen. Dies kann mit einer Vielzahl von Methoden erfolgen, aber am häufigsten besteht darin, Enzyme zu verwenden, um Proteine ​​und andere zelluläre Komponenten abzubauen, die in der Probe möglicherweise vorhanden sein können. Sobald die Nukleinsäuren isoliert sind, können sie für eine Vielzahl von Zwecken wie Sequenzierung oder PCR verwendet werden.



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