Einführung in PCR -Maschinen

PCR -MaschineAuch als PCR -Genamplifikationsinstrument, PCR -Amplifikationsinstrument, Polymerasekettenreaktionsnukleinsäureamplifikationsinstrument bekannt, ist ein Instrument, das spezifische DNA unter Verwendung der PCR -Technologie (Polymerase -Kettenreaktion) amplifiziert. Die PCR -Maschine wird in medizinischen und biologischen Labors häufig verwendet, z. B. um festzustellen, ob ein Testkörper PCR -Maschinen aufweist, beispielsweise in medizinischen und biologischen Laboratorien verwendet wird, um festzustellen, ob ein Testorganismus ein genetisches Erkrankungsprofil aufweist, um Infektiöse zu diagnostizieren, um Infektiöse zu diagnostizieren Krankheiten, um Gene zu replizieren und die Abstammung zu identifizieren. Was ist eine PCR -Maschine?

Hier ist die Inhaltsliste:

l Die Grundstruktur einer PCR -Maschine

l Arbeitsprinzip der PCR -Maschine

l Reaktionskinetik der PCR -Maschinen

Die Grundstruktur einer PCR -Maschine

Eine PCR -Maschine besteht normalerweise aus einem heißen Abdeckenteil, einem thermischen Zyklusteil, einem Übertragungsteil, einem Steuerteil und einem Stromversorgungsteil usw.

Arbeitsprinzip der PCR -Maschine

Das Arbeitsprinzip der PCR -Maschine ähnelt dem natürlichen Replikationsprozess von DNA, dessen Spezifität von Oligonukleotidprimern abhängt, die zu beiden Enden der Zielsequenz komplementär werden, und besteht aus drei grundlegenden Reaktionsschritten: Denaturierungsanneigung.

1. Denaturierung der Template -DNA

Die Template-DNA wird für eine bestimmte Zeit auf etwa 93 ° C erhitzt, um die doppelsträngige Template-DNA oder die doppelsträngige DNA zu dissoziieren, die von einer PCR-Maschine gebildet wird, um sie einzeln-strangiert zu machen, damit sie zur Vorbereitung auf die Primer binden kann die nächste Reaktionsrunde.

2. Tempern (Denaturierung) von Vorlagen -DNA und Primern

Nachdem die Template-DNA durch Erhitzen in einsträngige Einzelsträngige beendet wurde, wird die Temperatur auf etwa 55 ° C gesenkt und die Primer werden gepaart und an die einzelsträngige Komplementärsequenz der Template-DNA gebunden.

3. Erweiterung der Primer

Das DNA-Template-Primer-Konjugat wird unter der Wirkung der TaqDNA-Polymerase unter Verwendung von DNTP als Reaktionsmaterial und der Zielsequenz als Vorlage synthetisiert -Pairing und halbkonservierte Replikation.

Durch Wiederholen des Denaturierungs-Annealing-Extensionsprozesses können mehr "semi-konservierte Replikatketten" erhalten werden, und diese neuen Ketten können als Vorlagen für den nächsten Zyklus verwendet werden.

Die PCR -Maschine dauert 2 bis 4 Minuten, um jeden Zyklus abzuschließen, und so kann die in jedem Zyklus erzeugte DNA zur Vorlage für den nächsten Zyklus werden, und jeder Zyklus verstärkt die Kopienzahl der DNA -spezifischen Region zwischen zwei synthetischen Primern um 1 -Falt, und das PCR-Maschinenprodukt verstärkt in der exponentiellen Form von 2. Nach 25 bis 30 Zyklen (2 ~ 3 Stunden) die PCR-Maschine theoretisch das Gen nach 25 ~ 30 Runden theoretisch mehr als 109-fach (2 ~ 3 Stunden) und in der Praxis kann es im Allgemeinen 106 ~ 107-fach erreichen.

Reaktionskinetik der PCR -Maschine

Die drei Reaktionsschritte der PCR -Maschine werden wiederholt, was zu einer exponentiellen Erhöhung der DNA -Amplifikation führt. Die endgültige DNA -Amplifikation der Reaktion kann unter Verwendung von y = (1+x) n berechnet werden. Y repräsentiert die Anzahl der Kopien des amplifizierten DNA -Fragments, x repräsentiert die durchschnittliche Amplifikationseffizienz pro Amplifikation und n die Anzahl der Zyklen. Der theoretische Wert der durchschnittlichen Amplifikationseffizienz beträgt 100%, aber in der frühen Stufe der tatsächlichen Reaktion ist der Anstieg des DNA -Fragments der Zielsequenz exponentiell, und mit der allmählichen Akkumulation von PCR -Maschinenprodukten steigt das amplifizierte DNA -Fragment nicht mehr Exponentiell, aber in die lineare Wachstumsperiode oder die stationäre Periode eintreten, d. H. Der "Stagnationseffekt ", so dass die durchschnittliche Effizienz der PCR -Maschine die durchschnittliche Effizienz der PCR -Maschine erreicht, erreicht der theoretische Wert nicht.

Die Bioteke Corporation, die sich auf die molekulare Diagnostik und den schnellen Nachweis, insbesondere auf die Nukleinsäure-Extraktion, konzentriert, ist ein professioneller High-Tech-Hersteller und PCR-Maschinen. Es spielt in Wuxi City, Provinz Jiangsu, China. Wir freuen uns also darauf, mit Ihnen zusammenzuarbeiten.